吉林市醫(yī)學檢驗考前培訓

酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測抗體方法是什么？

1.間接法

最常用的方法，屬非競爭性結合試驗。原理：將抗原包被在固相載體上，加入待測樣本形成固相抗原-受檢抗體復合物；經溫育洗滌后，加入酶標二抗，常用羊抗人IgG，在固相上即形成固相抗原-待測抗體-酶標抗抗體復合物，加入底物后根據(jù)顯色的深淺確定待測抗體含量。多用于檢測IgG類型抗體。

2.雙抗原夾心法　

此法可檢測各類抗體，因此雙抗原夾心法的靈敏度和特異性要高于間接法。其原理及操作步驟類似雙抗體夾心法，也可采用一步法。由于機體產生抗體IgG的效價有限，一般不會出現(xiàn)鉤狀效應。

臨床上乙型肝炎表面抗體的測定常用此法。

3.競爭法

一般抗體檢測是較少采用，當相應抗原材料中含有與抗人IgG反應的物質，而且不易得到足夠的純化抗原或抗原的結合特異性不穩(wěn)定時，可采用這種方法測定抗體，目前臨床運用較多的是乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）和乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）的檢測。

競爭抗體與待測抗體的特異性及親和力越接近，則測定的可靠性越強。

4.捕獲法又稱反向間接法

主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測定，最常用的是病原體急性感染診斷中的IgM型抗體。原理：先將針對IgM的二抗包被于固相載體，加入待測標本，其中IgM類抗體可被固相抗體捕獲，再加入特異性抗原，其與固相上捕獲的IgM抗體結合后，加入酶標記特異性抗原的抗體，形成固相二抗-IgM-抗原-酶標記抗體復合物，加底物顯色后，即可對待測標本中IgM是否存在及含量進行測定。