初級檢驗師免疫學(xué)習(xí)教程

IRMA和RIA的區(qū)別分別有哪些？

IRMA與RIA同屬放射性核素標記免疫測定技術(shù)，在方法學(xué)上各具典型性。因此從某種意義上，二者的比較代表了標記免疫分析中競爭和非競爭結(jié)合方法學(xué)特點的比較。

①標記物：RIA是以放射性核素標記抗原，抗原有不同種類，標記時需根據(jù)其理化和生物學(xué)特性，選用不同的放射性核素和方法；IRMA則是標記抗體，為大分子蛋白，性質(zhì)較穩(wěn)定，不同抗體標記方法基本相同，標記抗體的比活度高，提高了測定的靈敏度。

②反應(yīng)速率：反應(yīng)速率與反應(yīng)物濃度成正比，IRMA反應(yīng)中，標記抗體為過量，且抗原抗體結(jié)合為非競爭性，故反應(yīng)速率比RIA快。

③反應(yīng)原理：RIA為競爭抑制性結(jié)合，反應(yīng)參數(shù)與待檢抗原量成反比，IRMA為非競爭性結(jié)合，反應(yīng)參數(shù)與待檢抗原濃度呈正相關(guān)。

④特異性：IRMA采用針對不同抗原決定簇的雙抗體結(jié)合抗原，反應(yīng)不易受交叉反應(yīng)物的干擾，測定特異性較高。

⑤靈敏度和檢測范圍：IRMA反應(yīng)中，抗原與抗體屬非競爭性，微量抗原能與抗體充分結(jié)合；RIA中標記抗原和待檢抗原競爭，與有限量抗體的結(jié)合不充分，故IRMA測定的靈敏度明顯高于RIA。此外，由于抗體量大，能結(jié)合較多的抗原量，IRMA用于抗原含量較高標本測定時，結(jié)果也較RIA好，IRMA標準曲線工作范圍較RIA寬1～2個數(shù)量級。

⑥其他：RIA所用抗體為多克隆性，因此對其親和力及特異性要求較高，但用量很少；IRMA為試劑過量的非競爭性結(jié)合反應(yīng)，對抗體親和力的要求不及RIA，但用量大。此外，RIA可以測定大分子和小分子抗原，但IRMA則只能測定至少有兩個抗原決定簇的抗原。